显微成像的无缝进化
结构化照明显微成像技术,轻松解答深层生物学问题。
适用于任何实验室,覆盖多种标本类型。
完全兼容
低至100纳米
深层
成像
晶格
结构化照明
在CrestOptics,我们相信超分辨率技术应当为所有科学家所用,以推进他们的研究。
正是基于这一理念,我们开发了 DeepSIM——首款晶格结构化照明(Lattice SIM)超分辨率模块,兼容任何现有正置或倒置显微镜的相机接口。
DeepSIM 代表了衍射受限显微成像技术的无缝进化。
它操作简便如宽场系统,同时具备共聚焦显微镜的Z轴穿透深度,使科学家能够通过常规制备的深层厚标本获取超分辨率数据,即使在具有挑战性的采样条件下也能胜任。
DeepSIM 概览
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跨尺度成像:多种晶格结构化照明模式
DeepSIM 背后的二维晶格结构化照明技术在活细胞成像实验中以极低的光毒性提升照明效率和均匀性。此外,二维晶格结构化照明提供了更优异的对比度,显著改善深层Z轴采集和图像重建的稳健性。
更重要的是,用户可以在3种晶格结构化照明模式中进行选择,以应对厚度递增和形态复杂度各异的标本。精心匹配的采样条件显著降低了图像重建中伪影的风险。
高通量
- 活细胞成像
- 细胞单层
- 薄样本(最大50 μm)
- 点状或丝状结构
标准模式
- 三维细胞培养
- 未透明化组织
- 厚样本最大100 μm
- 复杂结构(如肾小球)
深层成像
- 小型生物(秀丽隐杆线虫、斑马鱼)
- 透明化组织
- 100 μm以上深层成像
- 致密且均质的结构
产品描述
低至100纳米
横向分辨率
凭借结构化晶格照明和计算超分辨率数据重建,DeepSIM 提升了三维空间分辨率,横向达到100纳米,轴向达到300纳米。
Oregon Green™ 488 标记微管蛋白的HeLa细胞。右上角显示感兴趣区域(虚线框)的两级渐进放大。 红色箭头所示微管丝上的强度分布曲线在图中展示。 100x油镜,NA 1.45。
厚标本深层成像
常规制备厚样本的深层超分辨率数据。 DeepSIM 专为与共聚焦显微镜相当厚度的样本而设计,可在50 μm以上Z轴深度获取超分辨率数据。Z轴层切充分利用整个物镜工作距离,可从天然异质且复杂的样本中获得有意义的数据,为研究人员提供对其结构和组成的完整理解。
透明化小鼠脑GFP神经元三维深度编码视图(130 μm)。60x油镜,NA 1.4。
点击此处观看三维影片。
兼容标准共聚焦染色,支持近红外750 nm激发
多重成像是一种新兴技术,可同时从多个细胞标记物中采集信息。DeepSIM 与共聚焦显微镜的标准染色标记物配合表现优异。它是唯一覆盖从405 nm到近红外750 nm激发波长全光谱的SIM技术。DeepSIM 在荧光团选择上提供最大灵活性,并减少多色实验中的光谱重叠。
小鼠脑组织切片三维影片,展示带树突棘的神经元(黄色)、胶质细胞(品红)、星形胶质细胞(白色)和DNA(青色)。60x油镜,NA 1.4。样本来源:Di Angelantonio 教授,CLN2S@罗马智慧大学 – IIT。
兼容低倍物镜及 各类浸没介质
DeepSIM 的设计初衷是在大量物镜上保持高性能标准,从低倍20x到高倍100x。与干式物镜及各类浸没介质的兼容性扩展了适用应用范围,覆盖多种样本和支撑类型。DeepSIM 在视场与分辨率之间提供最佳平衡,以捕捉超大物体中的精细细节。
(i) 小鼠视网膜切片,染色:细胞核(蓝色)、波形蛋白(绿色)、CD39(橙色)、核标记物(红色)。显示100 μm Z轴堆叠的最大强度投影(MIP)。25x硅油镜,NA 1.05。样本来源:Lagerholm 博士、Yegutkin 博士、Svärd 博士(图尔库大学&InFLAMES研究旗舰,芬兰)及 Imreh 博士(卡罗林斯卡研究所,瑞典)。
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(ii) DeepSIM 采集斑马鱼眼部区域Cy7神经元标记物。显示70 μm Z轴堆叠的MIP。20x干式物镜,NA 0.8。样本来源:Paradisi 博士、Tartaglia 博士、Lauri 博士,罗马Bambino Gesù儿童医院,意大利。
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跨标本尺度的稳健分辨率: 从三维类器官到小型动物模型
DeepSIM 的分辨能力在广泛的空间尺度上得以保持,包括三维类器官、组织切片和小型动物模型(斑马鱼、秀丽隐杆线虫)。其扩展的灵活性使其可与转盘共聚焦技术结合,用于关联生物成像。
(i) Dissociated neurons co-cultured with cancer organoids: a MIP of a 13 μm Z-stack is shown. Staining: nuclei with DAPI (blue), EpCAM for cancer cells (green), b3 Tubulin (red), SV2A (synaptic density marker, orange), and Synaptophysin (neuroendocrine presynaptic marker, white). 60x Oil, NA 1.42. Sample credits: Prof. Hwang, Dr. Wang, Harvard University, MA, USA
(ii) Caenorhabditis elegans embryo stained with DAPI (blue) and Alexa568 showing protein condensates formed by the transcription factor HSF-1(orange). A MIP of a DeepSIM acquisition is shown. 100x Oil, NA 1.45. Sample credits: Prof. Klosin, Nencki Institute of Experimental Biology PAS, Warsaw, Poland
(iii) A MIP of a 40 μm Z-stack of a whole mouse brain slice with GFAP-positive astrocytes. 60x Oil, NA 1.42. Sample credits: Dr. Brunne and Dr. Failla, Universitätsklinikum Hamburg Eppendorf UKE – Microscopy Imaging Facility, Germany.
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温和的晶格结构化照明,适用于活细胞成像
凭借超过10 fps的时间分辨率,DeepSIM 可在高分辨率下捕获有意义的数据,同时最大限度降低光照暴露和光毒性风险。脆弱的活标本可实时观测,以监测细胞及亚细胞层面的变化。
表达肌动蛋白(绿色)和内体(青色)标记物的HeLa细胞。30秒延时成像。60x水镜,NA 1.27。样本来源:Fujioka 博士,北海道大学,日本
应用聚焦
兼容性进化
DeepSIM 旨在成为一项真正赋能的技术,将性能与模块化、可扩展系统的灵活性相结合。DeepSIM 可无缝升级任何现有带相机接口的显微镜架,无论是正置还是倒置,从而实现显著的成本节约。
DeepSIM 独立模块
适用于正置/倒置显微镜
技术特性
| DeepSIM 独立模块 | DeepSIM X-Light | |
| 视场 | 1024×1024像素(66×66 μm 100X | 333×333μm 20X) | 1024×1024像素(66×66 μm 100X | 333×333μm 20X) |
| 分辨率 | 横向分辨率(FWHM):~100 nm(100X NA 1.45) 轴向分辨率(FWHM):~300 nm(100X NA 1.45) | 横向分辨率(FWHM):~100 nm(100X NA 1.45) 轴向分辨率(FWHM):~300 nm(100X NA 1.45) |
| DeepSIM 采集速度 | 14.7 fps(1024×1024像素)- 使用DeepSIM滚动重建 249.9 fps | 14.7 fps(1024×1024像素)- 使用DeepSIM滚动重建 249.9 fps |
| 激光光谱范围 | 激发:400-750 nm;发射:400-850 nm | 激发:400-750 nm;发射:400-850 nm |
| 物镜规格 | -from 20X to 100X magnification range -high numerical aperture (NA) -plan apochromat correction | -from 20X to 100X magnification range -high numerical aperture (NA) -plan apochromat correction |
| 相机兼容性 | 任何具有6.5 μm像素尺寸的触发式相机 | 任何具有6.5 μm像素尺寸的触发式相机 |
| 转盘共聚焦升级 | 独立解决方案 | 兼容CrestOptics X-Light V3的附加模块 |
| 成像模式 | 超分辨率DeepSIM | 宽场 | 超分辨率DeepSIM | 转盘共聚焦X-Light V3 | 宽场 |
| 可升级显微镜配置 | 正置和倒置配置 | 倒置配置 |
| Software | μManager / VisiView® / NIS Elements | μManager / VisiView® / NIS Elements |
| Installation Conditions | 温度 23 ± 5°C,湿度 70% RH或更低 | 温度 23 ± 5°C,湿度 70% RH或更低 |
| Weight | 50.7磅 | 23公斤 | 44磅 | 20公斤 |
| Dimensions | 13.8 (w) x 20.2 (L) x 11.4 (h) inches 352.0 (w) 514.0 (L) x 290.5 (h) mm | 14.0 (w) x 17.1 (L) x 11.4 (h) inches 356.0 (w) 435.0 (L) x 290.5 (h) mm |
兼容性
兼容产品列表
探测器
Hamamatsu
显微镜
Evident (former Olympus)
Leica
Zeiss
照明器
Lumencor – CELESTA light engine
Software
MicroManager
VisiView
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